小鼠3-磷酸甘油脫氫酶ELISA試劑盒操作方法實驗原理：
   本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠3-磷酸甘油脫氫酶（GPDH）水平。用純化的小鼠3-磷酸甘油脫氫酶（GPDH）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中順次參加3-磷酸甘油脫氫酶（GPDH），再與HRP符號的3-磷酸甘油脫氫酶（GPDH）抗體，構成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗刷后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的效果下轉化成終究的黃色。色彩的深淺和樣品中的3-磷酸甘油脫氫酶（GPDH）呈正有關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），經過規范曲線核算樣品中小鼠3-磷酸甘油脫氫酶（GPDH）活性濃度。
樣本處理及請求：
1. 血清：室溫血液天然凝結10-20分鐘，離心20分鐘擺布（2000-3000轉/分）。細心搜集上清，保留過程中如呈現沉積，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的請求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘擺布（2000-3000轉/分）。細心搜集上清，保留過程中如有沉積構成，應當再次離心。
3. 尿液：用無菌管搜集，離心20分鐘擺布（2000-3000轉/分）。細心搜集上清，保留過程中如有沉積構成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢查排泄性的成份時，用無菌管搜集。離心20分鐘擺布（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。檢查細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度到達100萬/ml擺布。經過重復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘擺布（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成，應再次離心。
5. 安排標本：切割標本后，稱取分量。參加一定量的PBS，PH7.4。用液氮敏捷冷凍保留備用。標本消融后仍然堅持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS（PH7.4），用手藝或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘擺布（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。分裝后一份待檢查，其他冷凍備用。
6. 標本收集后盡早進行獲取，獲取按有關文獻進行，獲取后應盡快進行實驗。若不能立刻進行實驗，可將標本放于-20℃保留，但應避免重復凍融.
7. 不能檢查含NaN3的樣品，因NaN3按捺辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
小鼠3-磷酸甘油脫氫酶ELISA試劑盒操作方法操作過程：
規范品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設規范品孔10孔，在、第二孔平別離加規范品100μl，然后在、第二孔中加規范品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl別離加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔別離加規范品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl別離加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔平別離加規范品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl別離加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔平別離加規范品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔平別離取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔別離加規范品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度別離為1200U/L，800U/L ，400U/L，200U/L， 100U/L）。
加樣：別離設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其他各步操作一樣）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終究稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，悄悄晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗刷液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
洗刷：當心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗刷液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔參加酶標試劑50μl，空白孔在外。
溫育：操作同3。
洗刷：操作同5。
顯色：每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μl，悄悄震動混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
停止：每孔加停止液50μl，停止反響（此刻藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零，450nm波長依序丈量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加停止液后15分鐘以內進行。
小鼠3-磷酸甘油脫氫酶ELISA試劑盒操作方法注意事項：
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保留。
濃洗刷液也許會有結晶分出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗刷時不影響成果。
各步加樣均應運用加樣器，并常常校正其準確性，以避免實驗誤差。一次加樣時刻控制在5分鐘內，如標本數量多，引薦運用排槍加樣。
請每次測定的一起做規范曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于規范品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，核算時請zui終乘以總稀釋倍數（×n×5）。
封板膜只限一次性運用，以避免穿插污染。
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6個月