因為ELIS試劑盒日期不一樣，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官聯絡，傳統的酶聯免疫吸附法(ELISA法)不能切當的反映體內的抗體及CK的水平。80年代，國外的科研工作者根據ELISA技術的基本原理，建立了體外查看特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯免疫斑點技術(ELISPOT)。LISPOT法來源于ELISA，相比較傳統的ELISA法有所突破，是定量ELISA試劑盒技術的延伸和展開。
ELISA試劑盒實驗過程中遇到的各種疑問：
1，水質要素：點復溶液驗證，用娃哈哈礦泉水代替
2，實驗操作要素
吸取到其它相吹干，準確的取液吹干
離心不*，延伸離心時間
樣本的污染，更換樣本
乳化未處理*，溫浴（70℃）處理乳化現象
3，儀器試劑要素
離心管未清洗潔凈，準確的洗刷用具
有機溶劑的影響，ELISA試劑盒做試劑空白看影響成果
4，衍生化試劑要素（長時間衍生化試劑蛻變）,更換衍生化試劑
5，與曲線好壞有關,，保證曲線的正常
ELISA試劑盒回收率
1.空白管陽性高
樣本本身便是陽性樣本，換陰性樣本做回收率
空白管在實驗中被污染，實驗中防止交叉污染
水質要素用，娃哈哈礦泉水代替
2.偏 高
添加量不準確，的添加量
添加濃度不適合，添加適合的濃度
取液吹干量多，準確的取液吹干 
取到其它相層液體，取需用相吹干
復溶液未稀釋或參與量少，準確的稀釋復溶液