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上海酶聯生物研究所

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辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒簡介

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產品簡介: 辣根過氧化物酶標記抗體是目前廣泛用于免疫學與分子生物學、免疫細胞化學、病理學診斷以及自身免疫性疾病的臨床免疫學診斷。該產品為辣根過氧化物酶標記的親和純化OVA。
穩定性: 液體-20℃以下可保存可一年穩定,凍干粉-20℃以下可保存兩年以上穩定,避免反復凍融。使用時應按所需的濃度進行稀釋,應該現用現配,因為稀釋后的溶液中抗體及酶的有效活性會很快降低。

辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒應用范圍:
1. 抗原決定族的抗原性分析鑒定,各種抗原、抗體的定量、定性及定位分
析測定等。
2. ELISA 法: 1:2000~10000
3. 免疫印跡法:1:2000~5000
4. 免疫組化: 1:200~500

辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒將抗原或抗體固定在固相載體上的過程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用力。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力,其聯結多發生在Fc段上,抗體結合點暴露于外,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對該抗原的特異抗體作預包被,其后通過抗原抗體反應使抗原固相化。此間接結合在固相上的抗原遠離載體表面,其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大提高,因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。間接包被的另一優點是抗原用量少,僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質抗原可采用特殊的包被方式。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。可將聚苯乙烯板先經紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質,如聚賴氨酸、*等作預包被,也可提高核酸的結合力。也可用親和素*系統作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入*化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。

辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒結果計算與判斷
1. 所有OD值都應減除空白值后再行計算。
2. 以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。
3. 根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應IL-18BP含量,再乘上稀釋倍數即可。

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