來自匹茲堡大學等機構的研究人員近日利用新型的成像技術揭示DNAELISA試劑盒如何在蛋白質上循環纏繞幫助形成染色體端粒的特殊結構,相關研究刊登于雜志Scientific Reports上,該研究為理解端粒的結構及其如何維持提供了新的思路。端粒是線性染色體末端的保護性“帽子”,從功能角度來講,端粒更像是鞋帶末端的金屬箍一樣,保護鞋帶不解散開;在健康細胞中,端粒會通過“吞食”任何突出的DNA末端形成一種套索樣的T型環狀結構來保護染色體,如果沒有端粒細胞的DNA修復蛋白就會閱讀俯垂的DNA并以其作為損傷位點進行修復,并且試圖結合染色體或者發送特殊的蛋白對其進行消化。 研究者表示,一種名為端粒重復結合因子2(TRF2)的蛋白ELISA試劑盒是維持端粒結構完整性的關鍵,而這要取決于該因子在T型環狀結構形成過程中扮演的角色,但研究者并不知道由TRF2介導的DNA壓縮和T環形成背后隱藏的機制。研究者Hong Wang說道,TRF2可以壓縮DNA,這對于T環形成非常重要,但在此前工作中研究者并不清楚TRF2壓縮DNA的原因和機制,研究者僅能看到DNA鏈沿著TRF2復合物進進出出,卻看不到TRF2復合物中的DNA,這或許是因為利用傳統的原子力顯微鏡僅能看到蛋白-DNA顯現一個單團(a single blob)結構,同時DNA的軌跡信息也是缺失的。
本文研究中,研究人員利用了一種新型成像技術,即雙共振頻率增強靜電力顯微鏡(DREEM)技術,該技術采用的原理是DNA會以負電荷的形式沿著其“支柱”進行纏繞,而且相比較掃描DNA區域時,該技術在掃描蛋白時其更容易檢測到微弱的靜電作用的差異所在,因此DREEM技術就可以對組蛋白外部的DNA包裝結構進行直接觀測。研究者Wang說道,DREEM技術可以幫助我們通過TRF2復合物清楚觀察到DNA的軌跡,基于成像結果我們就可以闡明端粒內部兩種不同順序的DNA壓縮方式,在復合物內部DNA可以纏繞在TRF2上,隨后多個TRF2分子就會聚集在一起形成DNA環狀結構從TRF2蛋白結構中凸現出來。
研究者認為這種突出的環可以為端粒形成T型環狀結構提供進入位點,而整個過程zui終也將幫助維持端粒保護染色體末端的角色,并且減緩端粒DNAELISA試劑盒的損失,未來研究者的一項工作就是確定是否存在這樣的情況以及其所發生的機制,相關研究由NIH等機構提供資助。
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