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IHC、ICC、IF等,建議選擇注明的抗體,因為一般都是經過文章證明。
(5)檢測標本類型。用于檢測石蠟切片還是冰凍切片,一般能做石蠟切片的抗體,可能都可以用來檢測冰凍切片,但能做冰凍切片的抗體,不一定能檢測石蠟切片中的抗原。
(6)生產廠家。國外抗體生產商原裝抗體質量一般沒問題,但有點貴;而國內分裝廠家用的一抗工作液,價格便宜,但有時結果的穩定性和重復性稍差,尤其不同批次重復性較差。
(7)價格與質量的矛盾。動物ELISA試劑盒一抗原裝質量可能會好點,因為許多一抗避免反復凍融,且在稀釋液中穩定性較差(若時間長),但價格較貴。
2、二抗選擇要點
(1)種屬來源。主要根據一抗種屬來源來決定購買二抗來源,如一抗是小鼠來源,那二抗就買抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
(2)標記物的選擇。有HRP、Biotin、熒光素等標記物。一般SP三步法二抗選擇Biotin標記的二抗,以與后面的SP結合反應;而免疫熒光染色就需要購買不同熒光素標記的二抗,動物ELISA試劑盒如羅丹明、FITC、Cy3等常用熒光素。這主要與后面有無三抗和三抗種類有關。
(3)選擇IgM還是IgG。一般一抗是IgM,那么二抗就選擇IgM;反之,一抗是IgG,則二抗選擇IgG
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