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總膽固醇(T-CHO)測試盒性能指標

時間:2025/6/5閱讀:57
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總膽固醇(T-CHO)測試盒性能指標

檢測原理:

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性能指標:

1、試劑空白管吸光度≤0.100(光徑 0.5cm)。

2、線性:019.39mmol/L 范圍內(nèi),r20.995。

3、精密度:CV≤3%,批間相對極差≤5%。

4、穩(wěn)定性:原裝試劑盒在 2℃~8℃避光保存,有效期為 12個月。開啟后 2℃~8℃避光保存,可穩(wěn)定 3 個月。

所需儀器耗材及試劑: 500nm 波長的酶標儀及 96 孔板,37℃水浴鍋或恒溫 箱,臺式低速離心機,各種規(guī)格移液器,蒸餾水,渦旋混勻 器,試管或離心管。

操作過程

1、樣本處理

①、血清(漿):直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀 釋后測定。

②、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 鐘,取上清測定。[]:一般建議細胞密度在 100 萬個/mL 以上。 

③、組織樣本:準確稱取組織重量,按重量(g):體積 (mL)=1:9 的比例,加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì),冰水 浴條件下機械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取 上清液待測。[]:如組織樣本均為非高脂樣本,勻 漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生 理鹽水進行勻漿提??;如組織樣本均為高脂樣本或 部分為高脂樣本,勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無水乙醇進行 勻漿提取。

④、細胞樣本: 

A、細胞收集:將制備好的細胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)/分, 離心 10 分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;用等滲緩沖 液(推薦 0.1mol/LpH77.4 磷酸鹽緩沖液)清洗 12 次,同樣 1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液, 留細胞沉淀; 

B、細胞破碎:加入 0.20.3mL 的勻漿介質(zhì)(推薦 0.1mol/L、pH77.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)進 行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率 300W,35 /次,間隔 30 ,重復(fù) 35 )或手動勻漿,制備好 的勻漿液不離心直接測定。也可采用裂解液裂解(TritonX-100,12%,裂解 3040 分鐘),裂解好的 液體不離心直接測定。

[]:建議收集的細胞密度在 100 萬個/mL 以上。破碎 好的液體可顯微鏡觀察細胞是否破碎完全。

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