酶聯免疫試劑盒在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下，這種判斷法較為合適。在得出標本( S)和陰性對照(N)的A 值后，計算S/N 值。也有寫作P/N 的，這里的P 不代表陽性(positive)，而是病人(pati ent)的縮寫，不應誤解。為避免混淆，更宜用S/N 表示。在早期的間接法酶聯免疫試劑盒中，酶聯免疫試劑盒有些作者定出S/N 為陽性標準，現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的 S/N 的閾值。更應注意的是，N 所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液，以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。
酶聯免疫試劑盒檢測中試劑的結果判斷之定性測定
定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出 "有"或"無"的簡單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果，即用滴度來表示反應的強度，其實質仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中，將標本作試劑的制備必須標準化，陽性和陰性的對照品應符合一定的規格，酶聯免疫試劑盒須配用精密的儀器，并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現舉某種檢測 HBsAg 的試劑盒為例。
酶聯免疫試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg 的復鈣人血漿，陽性對照品HBsAg 的含量標明為P=9±2ng /ml。每次試驗設2 個陽性對照和3 個陰性對照。測得A 值后，先計算陰性對照A 值的平均數(NC X )和陽性對照A 值的平均數(PCX)，兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400)，試驗才有效。3 個陰性對照 A 值均應≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，酶聯免疫試劑盒而已另兩個陰性對照重新計算NCX；如有兩個陰性對照A 值超出以上范圍，則該次實驗無效。
