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Roche、Sigma、GIBCO、Amresco、Fluka、Merck、Invitrogen、Difco、Serva、Whatman等試劑品牌,大家都在用, SP6核糖核酸聚合酶價格也不貴,規格、包裝多樣。
中文名稱: SP6 RN聚合酶
其他中文名稱: SP6核糖核酸聚合酶
英文名稱: SP6 RN Polymerse
級別:BR
分子量:單體約98kD
來源:大腸桿菌細胞,含有編碼相應RN聚合酶的克隆基因
濃度:20u/ul(≥100U/ul,HC)
活力定義:是指在37℃、60分鐘內將1nmol MP合成摻入到寡聚核苷酸片段(DE-81)光吸收形式)所需的酶量
酶活性分析混合物:40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亞精胺,0.5mM 各種NTP, 0.6MBq/ML(3H).-TP和20ug/ml含有相應啟動子序列的質粒DN
保存緩沖:每種聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BS,150mM NC1, 0.5mM ELUGENT去污劑和50%(V/V) 甘油
5×轉錄緩沖液:200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NC1和10mM 亞精胺
抑制劑:金屬螯合劑,當NC1或KC1濃度高于150mM(SP6和T7 RN聚合酶)時,酶活性降低超過50%,硫酸銨可使酶活性降低超過50%
失活:加入EDT或者70℃加熱10分鐘
質量控制:相關測試表明無內切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能測試:體外轉錄反應
特點:合成摻入特殊核苷酸,如氨基-、生物素-、熒光素-、地高辛-標記的核苷酸
性狀:液體,是一種依賴DN的聚合酶,對SP6啟動子序列表現高度專一性。用該酶合成RN,僅能以SP6 DN或克隆在SP6 啟動下游的DN作為合成模板。該酶能以32P,35S及3H標記的核苷三磷酸為底物
用途:生化研究。合成標記和未標記的RN,用于雜交、體外RN翻譯;作為RN、siRN、RNse酶切保護分析的底物以及基因組DN測序的模板;研究RN的二級結構和RN-蛋白質相互作用、RN剪接;標記的RN探針合成,用于印跡實驗、原位雜交、microrry雜交
保存:-20℃
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