兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒
ELISA試劑盒的制備方法
包括以下步驟：
- 抗原表位的計算機篩選；
- 抗原的制備；
- 血清的采集；
- 間接ELISA方法的建立；
- 間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證；
- 試劑盒的穩定性驗證；
- 對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩定性合格、重復性好。應用本發明制得的試劑盒能有效檢出感染豬的戊型肝炎病毒，適用于大批量發病樣本的檢測，可用于豬戊肝的快速診斷，并預防、控制豬戊肝病毒的流行和阻斷戊肝病毒由豬向人傳播。
兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒
雙抗體夾心法
1. 包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒
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