大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒

【樣品的準(zhǔn)備和保存】

樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存，且避免反復(fù)凍融。

血清——用干凈試管收集血液，室溫凝固2小時(shí)或4℃過(guò)夜，離心1000×g 10分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒

酶標(biāo)儀判讀結(jié)果
◎顯色反應(yīng)終止后應(yīng)立刻比色（30分鐘內(nèi)）。
       常見(jiàn)的顯色系統(tǒng)有OPD和TMB二種，以后者zui為常見(jiàn)，而TMB酸不易終止因此必須盡快比色以免影響結(jié)果。OPD終止后顯棕色，測(cè)定波長(zhǎng)為490nm；
     TMB終止后顯黃色，測(cè)定波長(zhǎng)為450nm，
        二種底物的校正波長(zhǎng)均用630nm。
        使用雙波長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)可以消除反應(yīng)板條上的劃痕手印的干擾。同時(shí)要注意反應(yīng)板應(yīng)用紙吸干后才能置酶標(biāo)儀中比色，否則吸光度易出現(xiàn)負(fù)值或損壞濾光片。
報(bào)告方式
◎定性試驗(yàn) 國(guó)內(nèi)外為便于統(tǒng)一計(jì)算，一律按S/C.O方式報(bào)告，S為標(biāo)本A值，C.O即Cut Off值（陽(yáng)性判定值)
◎夾心法和間接法以S/C.O≥1為陽(yáng)性；
     竟?fàn)幏ㄅc中和法以S/C.O﹤1為陽(yáng)性
◎Cut Off的計(jì)算公式以試劑盒說(shuō)明書(shū)的為準(zhǔn)常見(jiàn)的有：
◎A）  C.O=2.1×N（當(dāng)N不足0.05時(shí)按0.05計(jì)），
◎此公式由P/N>2.1換算而來(lái)，常用于夾心法。
◎B） C.O=0.5×N，從抑止率公式換算而來(lái)，
◎常用于竟?fàn)帲泻头?BR>◎C） C.O=N+C（C為常數(shù)），用于間接法。
◎D)    C.O=C×P+N（C為常數(shù)），用于間接法。此公式zui客觀，但對(duì)生產(chǎn)廠家要求很高，陰陽(yáng)性對(duì)照測(cè)定值要基本恒定。

大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒