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大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒報價

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更新時間:2018-03-20 18:24:10瀏覽次數:230次

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Rat 25 hydroxy vitamin D3 (25 (OH) D3/25 HVD3) ELISA kit
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大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒報價實驗步驟 


一、預試驗

(一)抗體包被的酶標板的制備

1.  以碳酸鹽緩沖液將抗體稀釋成適當濃度(參考:5ug/ml),加入酶標板(50ul/孔),以膠帶封口,于4℃過液。

2.  棄抗體液,以雙蒸水沖洗3次,自然干燥后以膠帶封口。此為由已知抗體包被的酶標板,備用。

(二)底物濃度的摸索在底物緩沖液中加入不同量的底物(參考:5mg/10ml),加入酶標板中(50ul/孔),以膠帶封口,37℃避光保存2h,在沒有明顯變色的條件下選擇盡可能大的底物濃度。

(三)酶標抗原濃度的摸索選擇明確為陰性的標本,加至已包被抗體的酶標板中(50ul/ 孔);用稀釋液稀釋酶標抗原至適當倍數(參考:40~4000倍),同時加入酶標板中(50ul/ 孔),混合后封口后于37℃作用30min。大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒報價以洗液連續沖洗5次,然后于吸水紙上拍干,加入已摸索好的底物封口后于37℃作用30min,在保持有明顯變色的條件下選擇盡可能小的酶標抗原濃度。

、正式試驗

1.  以稀釋液將待檢標本做適當稀釋(預試中確定)加入包被有已知抗原的酶標板中(50ul/孔),加封口膠帶于37℃作用30min。

2.  棄反應液,以沖洗液連續洗板5次并于吸水紙上拍干。

3.  加入酶標抗體(濃度在預試中確定)。加封口膠帶后于37℃作用30min。

4.  重復第2步。

5.  加底物(濃度在預試中確定),加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min,其間不時觀察,顯色滿意后加終止液50ul/孔。

6.  于酶標儀測定OD值,OPD用492nm測定,TMB用450nm測定。窗體頂端

大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒報價結果演示

 

大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒報價結果判斷定性測定 

  定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來表示反應的強度,其實質仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應的zui高稀釋度即為滴度。根據滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。

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