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小鼠腎小球系膜細胞,MES-13細胞
本公司在長期的細胞研究過程中不斷優化實驗條件,針對不同客戶研究需要,提供包含神經元細胞、星形膠質細胞在內的多種原代細胞產品,并針對各類原代細胞的營養需求研發的培養產品。原代細胞產品產品經過細菌、真菌、霉菌、支原體和病毒檢測,表達多種神經細胞特異性標記。原代細胞*培養基特別添加能有效改善細胞生長狀態的營養物質和針對不同物種特別甄選的優質培養液,適合各類原代細胞的體外培養。
開始小鼠腎小球系膜細胞,MES-13細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養液(MEM-0.2%LH培養液或MEM培養液或199等適合細胞有要求的培養液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20 ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長狀態良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液*覆蓋細胞表面。至細胞*脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養量。加塞,置于37±1℃孵箱培養。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
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