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前列腺癌細(xì)胞 DU145細(xì)胞

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更新時(shí)間:2017-06-15 20:15:30瀏覽次數(shù):282次

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開始[前列腺癌細(xì)胞]DU145細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml(以上用具需經(jīng)121至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4、—20冰箱
操作步驟:鏡檢[前列腺癌細(xì)胞]DU145細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m17.5%碳酸氫鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1孵箱培養(yǎng)。約24天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。

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人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
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人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒
人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒
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人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒
人皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒
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人脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA試劑盒
人睪酮(T)ELISA試劑盒
人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒
人雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒
人雌三醇(E3)ELISA試劑盒
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人三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒
人甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒

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