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HP Fungal DNA Mini Kit (5)*

時(shí)間:2014/9/15閱讀:627
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DNA 分子在瓊脂糖凝膠中泳動時(shí)有電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)。 DNA 分子在高于等電點(diǎn)的 pH 溶液中帶負(fù)電荷,在電場中向正極移動。由于糖 - 磷酸骨架在結(jié)構(gòu)上的重復(fù)性質(zhì),相同數(shù)量的雙鏈 DNA 幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速度向正極移動。

制備瓊脂糖凝膠HP Fungal DNA Mini Kit (5)

.稱 1. 2g 瓊脂糖,加 100ml 電泳緩沖液( 1×TAE )加熱熔化,取出搖勻,即為 1. 2% 的凝膠。

2. 當(dāng)膠液冷至 60 時(shí),加 EB10μ,小心混勻,緩慢倒入制膠模具中,在膠一端插上梳子。

.待膠凝固后,撥出梳子,將模具置于電泳槽中,加入 1×TAE ,讓液面高于膠面 2 -3mm 

.取 4ul 質(zhì)粒,加 2ul lodaing buffer  6ulddH 2 O ,混勻,用加樣器吸取樣品。加入點(diǎn)樣孔中,注意加樣器吸頭應(yīng)恰好置于凝膠點(diǎn)樣孔中,不可刺穿凝膠,也要防止將樣品溢出孔外。

.接通電源, 1-5V/cm 電壓,開始電泳。HP Fungal DNA Mini Kit (5)

.當(dāng)溴酚蘭染料移動到距離膠前沿 1 -50px 處,停止電泳。

7. 切斷電源后,取出凝膠,在紫外燈( 360nm  312nm  254nm )下或經(jīng)凝膠成像系統(tǒng)觀察或拍照。

堿裂解法提取質(zhì)粒是根據(jù)共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒 DNA 與線性染色體 DNA 在拓?fù)鋵W(xué)上的差異來分離它們。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 這個(gè)狹窄的范圍內(nèi),線性的 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而被變性,盡管在這樣的條件下,共價(jià)閉環(huán)質(zhì)粒 DNA 的氫鍵會被斷裂,但兩條互補(bǔ)鏈彼此相互盤繞,仍會緊密地結(jié)合在一起。當(dāng)加入 Ph4. 8 的乙酸鉀高鹽緩沖液恢復(fù) pH 至中性時(shí),共價(jià)閉合環(huán)狀的質(zhì)粒 DNA 的兩條互補(bǔ)鏈仍保持在一起,因此復(fù)性迅速而準(zhǔn)確,而線性的染色體 DNA 的兩條互補(bǔ)鏈彼此已*分開,復(fù)性就不會那么迅速而準(zhǔn)確,它們纏繞成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體 DNA 與不穩(wěn)定的大分子 RNA 、蛋白質(zhì) -SDS 復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。

HP Fungal DNA Mini Kit (5)相關(guān)產(chǎn)品系列表:

xy-E10742    人3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA試劑盒96t/48t    Human 3-Nitrotyrosine,3-NT ELISAkit

xy-E10743    人糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒96t/48t    Human glycosaminoglycan,GAG ELISAkit

xy-E10744    人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒96t/48t    Human cysteinyl leukotrienes,CysLTs ELISAkit

xy-E10745    人鈣腔蛋白(CALU)ELISA試劑盒96t/48t    Human calumenin,CALU ELISAkit

xy-E10746    人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒96t/48t    Human apoprotein A5,apo-A5 ELISAkit 

xy-E10747    人維生素D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒96t/48t    Human Vitamin D-binding protein,DBP ELISAkit

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xy-E10749    人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒96t/48t    human serum amyloid A3,SAA3 ELISAkit

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xy-E10751    人細(xì)胞色素b561(cytb561)ELISA試劑盒96t/48t    Human lipocalin 2,LCN2 ELISAkit

xy-E10752    人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒96t/48t    Human lipocalin 2,LCN2 ELISAkitHP Fungal DNA Mini Kit (5)

xy-E10753    人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒96t/48t    Human adipocyte fatty acid-binding protein,a-FABP ELISAkit

xy-E10754    人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒96t/48t    Human Glypican-3,GPC-3 ELISAkit

xy-E10755    人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒96t/48t    Human Glucose transporter 3,GLUT3 ELISAkit

xy-E10756    人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒96t/48t    Human Retinol binding protein,RBP ELISAkit

xy-E10757    人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒96t/48t    Human hydroxylysine,Hyl ELISAkit

xy-E10758    人羥賴氨酸(Hyl)ELISA試劑盒96t/48t    Human hydroxylysine,Hyl ELISAkit

xy-E10759    人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA試劑盒96t/48t    Human GTPase activating protein,GAP ELISAkit

xy-E10760    人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒96t/48t    Human Apolipoprotein H,apo-H ELISAkit

xy-E10761    人糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA試劑盒96t/48t    Human glycophosphatidylinositol,GPI ELISAkit

xy-E10762    人美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒96t/48t    Human pokeweed mitogen,PWM ELISAkit

xy-E10763    人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒96t/48t    Human Lipopolysaccharides,LPS ELISAkit

xy-E10764    人preptin ELISA試劑盒96t/48t    Human preptin ELISAkit

xy-E10765    人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒96t/48t    Human peroxisome proliferators activator receptors 

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