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技術(shù)文章

高通量核酸提取組合方案

閱讀:336發(fā)布時(shí)間:2015-3-12

核酸提取,也許是現(xiàn)代生物學(xué)中zui基礎(chǔ)也zui重要的工作了。

疾病診斷,遺傳育種,藥物篩選,發(fā)育表達(dá),分子進(jìn)化… … 幾乎生物科學(xué)中每一個(gè)部分的研究,都離不開分離純化所需要的核酸組分。而且,隨著技術(shù)的進(jìn)步,很多研究都向高通量方面靠攏,因?yàn)闃颖镜臄?shù)量增多,得出的結(jié)果就更有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義也更可信。

如果您面對一天上百個(gè)的樣品,你還能指望傳統(tǒng)的有機(jī)液相抽提法嗎?每個(gè)樣品都需要小心翼翼地將水相取出,多次重復(fù),不僅白白消耗了實(shí)驗(yàn)人員的寶貴時(shí)間,還要忍受有機(jī)溶劑的熏陶,是在無法勝任繁重的抽提任務(wù)。



市面上已經(jīng)有不少標(biāo)榜實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)核酸提取的自動(dòng)化設(shè)備,價(jià)格相對比較合適,但其處理能力通常10-20個(gè),而且使用專門的提取耗材和試劑,顯然不能解決問題。


市面上也有一些大型的設(shè)備,能完成整板96個(gè)樣品的額提取,但動(dòng)則上百萬的購置費(fèi)用顯然都太貴了。實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)寶貴而有限,不能讓一個(gè)前處理設(shè)備如此喧賓奪主。



對于核酸提取設(shè)備,對它的要求就是可靠,可重現(xiàn),運(yùn)行費(fèi)用低。但目前市面上的多數(shù)自動(dòng)化核酸提取設(shè)備,采用的是封閉式的操作系統(tǒng),無論是實(shí)驗(yàn)方法,還是所用的試劑耗材,都必須從廠家那里付費(fèi)獲得,造成運(yùn)行費(fèi)用高昂設(shè)備使用效率不高等問題;某些系統(tǒng)設(shè)計(jì)是具有開放性的,但需要用戶去設(shè)定復(fù)雜的運(yùn)行程序,讓人望而卻步;還有的功能過于單一,還需要配合其他分液設(shè)備才能工作,同樣不盡人意。



花zui小的錢,辦zui多的事,一直是廣大科研人員孜孜以求的工作信念。德淙科儀誠意提供高通量的磁珠核酸提取組合方案,花小型自動(dòng)核酸提取儀的價(jià)錢,實(shí)現(xiàn)大型工作站才能實(shí)現(xiàn)的高通量核酸提取之事。



標(biāo)準(zhǔn)組件:

微孔板恒溫振蕩器MB100-2A           Medusa96 高通量移液器                          磁鐵盤



選用組件:




Hettich 320 帶水平轉(zhuǎn)子            高通量組織研磨器                     密封墊以及密封墊封板器

組織,質(zhì)粒,植物                     植物,酵母,組織                     質(zhì)粒,細(xì)菌


標(biāo)準(zhǔn)組件已經(jīng)可以完成核酸分離純化過程,可進(jìn)行全血,血清的核酸提取以及PCR產(chǎn)物純化。各種選用組件主要用于各種不同來源材料的前處理過程。

以全血DNA提取為例,介紹提取過程以及過程中每個(gè)組件的功能:


1.       血樣從*手動(dòng)轉(zhuǎn)移到96孔盤:
這步操作zui為復(fù)雜,一方面*的規(guī)格不同于96
孔盤,另一方面,血樣存在血塊容易堵塞吸頭。
這步進(jìn)行自動(dòng)化操作,成本很高,技術(shù)難度很大。目前幾家大型的工作站廠家。

2.       加入磁珠和蛋白酶,然后裂解液,并吸噴混合:
由Medusa96移液器來完成。
溶液可放在各種規(guī)格的溶液槽中。

3.       加熱到50℃并震蕩孵育10分鐘:
由微孔板恒溫振蕩器來完成,充分裂解樣品并吸附DNA。

4.       放于磁鐵盤上吸附1-2分鐘,然后吸去廢液:
磁鐵盤放在Medusa96的盤面上,由用戶操作吸液頭將廢液給吸去。

5.       加液,震蕩,磁吸,去廢,重復(fù)多次
由Medusa96來承擔(dān)移液的任務(wù);微孔板恒溫振蕩器對磁珠進(jìn)行充分洗滌。

6.       加液,震蕩,磁吸,收集,完成提取
由Medusa96來承擔(dān)移液的任務(wù);微孔板恒溫振蕩器對磁珠進(jìn)行加熱洗脫。


整個(gè)過程大約只需要60分鐘,已經(jīng)包括血樣轉(zhuǎn)移,試劑準(zhǔn)備的時(shí)間。

速度*可以與任何一個(gè)全自動(dòng)的核酸提取平臺相比,甚至更好。


提取的結(jié)果:

采用同一批抗凝血200ul,提取出來的96個(gè)DNA

樣品進(jìn)行凝膠電泳,觀察其完整性。


OD 260/280結(jié)果:

純度高,一致性很好

凝膠電泳結(jié)果:

分子完整,一致性很好

 





關(guān)于Medusa96高通量移液器:


Medusa96是一款96通道1000ul大體積的電子移液器,具有XYZ三維移動(dòng)的平臺支架,方便操作者準(zhǔn)確可靠地進(jìn)行移動(dòng),定位。

移液范圍從10~1000ul,足夠滿足核酸提取的需求。

具備吸噴混合的功能,方便進(jìn)行加樣前的磁珠混勻,以及提高裂解、洗滌、洗脫的效果。

具有4.3寸大屏幕高分辨率觸摸屏,方便用戶進(jìn)行一吸一噴,一吸多噴等動(dòng)作編排。


移液精度:

100ul CV < 0.8%,準(zhǔn)確度±1ul(使用200ul tips)

1000ul CV < 0.5%,準(zhǔn)確度±10ul(使用1000ul tips)







關(guān)于德淙科儀:


德淙科儀成立于2010年,是專注于為生命科學(xué)以及分子醫(yī)學(xué)研究者提供自動(dòng)化設(shè)備的新型儀器設(shè)備制造商。公司目前主要產(chǎn)品有高通量移液器以及多盤位干浴器。公司也開展代理業(yè)務(wù),跟國內(nèi)外的主要行當(dāng)?shù)膹S家都有很好的渠道,能為廣大研究者提供的產(chǎn)品資訊,為實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)提供專業(yè)意見。


德淙科儀能為用戶提供本整合方案中所涉及的各種標(biāo)準(zhǔn)組件以及選用組件,并提供對整合方案效果的檢驗(yàn)和評價(jià)服務(wù),價(jià)格合理,服務(wù)周到,歡迎廣大用戶前來咨詢選購。


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