一、原理
　　
　　還原型抗壞血酸（AsA）可以把鐵離子還原成亞鐵離子，亞鐵離子與紅菲咯啉（4,7-二苯基-1,10-菲咯啉，BP）反應(yīng)形成紅色螯合物。在534nm波長的吸收值與AsA含量正相關(guān)，故可用比色法測定。脫氧抗壞血酸（DAsA）可由二硫蘇糖醇（DTT）還原成AsA。測定AsA總量，從中減去還原型AsA，即為DAsA含量。
　　
　　二、儀器與用具
　　
　　離心機(jī)；分光光度計(jì)；研缽；試管。
　　
　　三、試劑
　　
　　5%三氯yi酸（TCA）；20%TCA；無水乙醇溶液；0.4%磷酸－乙醇溶液；0.5%BP－乙醇溶液；0.03%FeCl3－乙醇溶液；0.6g/LDTT；Na2HPO4－NaOH溶液：以0.2mol/LNa2HPO4和1.2mol/LNaOH等量混合；60mmol/LDTT－乙醇。
　　
　　四、方法
　　
　　1.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線配制濃度為2mg/L，4mg/L，6mg/L，8mg/L，10mg/L，12mg/L，14mg/L的AsA系列標(biāo)準(zhǔn)液。取各濃度標(biāo)準(zhǔn)液1.0ml于試管中，加入1.0ml5%TCA、1.0ml乙醇搖勻，再依次加入0.5ml0.4%H3PO4－乙醇、1.0ml0.5%BP－乙醇、0.5ml0.03%FeCl3－乙醇，總體積5.0ml。將溶液置于30℃下反應(yīng)90min，然后測定A534。以AsA濃度為橫坐標(biāo)，以A534為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出線性方程。
　　
　　2.提取取植物葉片1.0g，按1∶5（W/V）加入5%TCA研磨，4000r/min離心10min，上清液供測定。
　　
　　3.測定
　　
　　（1）AsA測定取1.0ml樣品提取液于試管中，按上述相同的方法進(jìn)行測定，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算AsA含量。
　　
　　（2）DAsA測定向1.0ml樣品液中加入0.5ml60mmol/LDTT－乙醇溶液，用Na2HPO4－NaOH混合液，將溶液PH調(diào)至7~8，置于室溫下10min，使DAsA還原。然后加入0.5ml20%TCA，把PH調(diào)至1~2。按AsA相同方法進(jìn)行測定，計(jì)算出總AsA含量，從中減去AsA，即得DAsA含量。上海友騰生物傾力為客戶提供上萬種科研試劑，提供*、zui全、zui有效的科研試劑產(chǎn)品，質(zhì)量被全國各大院校科研機(jī)構(gòu)認(rèn)可。
　　
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