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上海友騰生物科技有限公司

微核檢測技術

時間:2014-3-12閱讀:407
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一、實驗目的

學會利用所學知識,進行自主實驗設計;了解染色體畸變的各種類型及原理,掌握利用微核檢測技術監測環境污染的一般方法。

二、實驗原理

微核(micronucleus, 簡稱MCN),也叫衛星核,是真核類生物細胞中的一種異常結構,是染色體畸變在間期細胞中的一種表現形式。微核往往是各種理化因子,如輻射、化學藥劑對分裂細胞作用而產生的。在細胞間期,微核呈圓形或橢圓形,游離于主核之外,大小應在主核1/3以下。微核的折光率及細胞化學反應性質和主核一樣,也具合成DNA的能力。一般認為微核是由有絲分裂后期喪失著絲粒的染色體斷片產生的。有實驗證明,整條染色體或幾條染色體也能形成微核。這些斷片或染色體在分裂過程中行動滯后,在分裂末期不能進入主核,便形成了主核之外的核塊。當子細胞進入下一次分裂間期時,它們便濃縮成主核之外的小核,即形成了微核。

已經證實,微核率的大小是和作用因子的劑量或輻射累積效應呈正相關,這一點與染色體畸變的情況一樣。所以許多人認為可用簡易的周期微核計數來代替繁雜的中期畸變染色體計數。由于大量新的化合物的合成,原子能的應用,各種各樣工業廢物的排出等都存在污染環境的可能性,欲了解這些因素對機體潛在的遺傳危害,需要有一套高度靈敏,技術簡單易行的測試系統來監測環境的變化。只有真核類的測試系統更能直接推測誘變物質對人類或其它高等生物的遺傳危害,在這方面,微核測試是一種比較理想的方法。目前國內外不少部門已把微核測試用于輻射損傷、輻射防護、化學誘變劑、新藥試驗、食品添加劑的安全評價,以及染色體遺傳疾病和癌癥前期診斷等各個方面。

三、實驗材料

蠶豆(vicia faba, 2n=12)干種子。

四、實驗儀器及用具

顯微鏡、手動計數器、鑷子、載玻片、蓋玻片、燒杯、瓷盤、培養箱、分析天平、水浴鍋、酒精燈、剪刀、解剖針、濾紙、鉛筆、標簽紙、膠水等。

五、藥品和試劑

根據學生試驗設計要求,提供相應的藥品和試劑。

六、實驗步驟

(一)實驗設計

學生可選擇不同的方法自行設計進行材料的誘變處理,并將試驗設計交指導老師審核后進行試驗操作。

(二)實驗實施

學生根據實驗設計獨立進行實驗實施。并撰寫實驗報告。

七、實驗作業

產生微核的根尖細胞在分裂中期可能出現什么樣的分裂圖

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