培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型，對營養物質的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營養角度分析，培養基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外，培養基還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用zui廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。但多次反復融化，其凝固性降低。
材料
天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液管及移液管筒、培養皿及培養皿盒、玻璃棒、燒杯、試管架、鐵絲筐、剪刀、酒精燈、棉花、線繩、牛皮紙或報紙、紗布、乳膠管、電爐、滅菌鍋、干燥箱。
藥品試劑
蛋白胨、牛*膏、NaCl、K2HPO4、瓊脂、NaNO3、KCl、MgSO4、FeSO4、蔗糖、麥芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽計、磷酸銨、5%NaOH溶液、5%HCl溶液。
流程
稱藥品→溶解→調pH值→融化瓊脂→過濾分裝→包扎標記→滅菌→擺斜面或倒平板。
步驟
培養基的制備
稱量藥品
根據培養基配方依次準確稱取各種藥品，放入適當大小的燒杯中，瓊脂不要加入。蛋白胨極易吸潮，故稱量時要迅速。
溶解
用量筒取一定量（約占總量的1/2）蒸餾水倒入燒杯中，在放有石棉網的電爐上小火加熱，并用玻棒攪拌，以防液體溢出。待各種藥品*溶解后，停止加熱，補足水分。如果配方中有淀粉，則先將淀粉用少量冷水調成糊狀，并在火上加熱攪拌，然后加足水分及其它原料，待*溶化后，補足水分。
調節pH
根據培養基對pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液調至所需pH。測定pH可用pH試紙或酸度計等。
溶化瓊脂
固體或半固體培養基須加入一定量瓊脂。瓊脂加入后，置電爐上一面攪拌一面加熱，直至瓊脂*融化后才能停止攪拌，并補足水分（水需預熱）。注意控制火力不要使培養基溢出或燒焦。
過濾分裝
先將過濾裝置安裝好。如果是液體培養基，玻璃漏斗中放一層濾紙，如果是固體或半固體培養基，則需在漏斗中放多層紗布，或兩層紗布夾一層薄薄的脫脂棉趁熱進行過濾。過濾后立即進行分裝。分裝時注意不要使培養基沾染在管口或瓶口，以免浸濕棉塞， 引起污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝裝量為管高的1/5，半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜；分裝三角包扎標記
培養基分裝后加好棉塞或試管帽，再包上一層防潮紙，用棉繩系好。在包裝紙上標明培養基名稱，制備組別和姓名、日期等。
滅菌
上述培養基應按培養基配方中規定的條件及時進行滅菌。普通培養基為121℃20min，以保證滅菌效果和不損傷培養基的有效成份。培養基經滅菌后，如需要作斜面固體培養基，則滅菌后立即擺放成斜面斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜；半固體培養基滅菌后，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。
倒平板
將需倒平板的培養基，于水浴鍋中冷卻到45～50℃,立刻倒平板。
