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干細胞無血清凍存液操作事項

閱讀：1298發(fā)布時間：2014-5-12

使用說明：

1. 細胞消化和計數(shù)，用*對待凍存的細胞進行消化，并對細胞進行計數(shù)。

2. 1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘（4℃），去掉上清。

3. 根據(jù)細胞計數(shù)的情況，加入適量的干細胞無血清凍存液，使細胞密度在1×10⁶左右（或根據(jù)自己希望達到的細胞密度）。

4. 輕輕地重懸細胞（務必重懸均勻）。

5. 將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標記或者貼上標簽）中，旋緊凍存管蓋。

6. 將凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃。

7. 第二天將細胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。

注意事項：

● 用處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

● 控制好*的消化時間，切記消化過度，會影響復蘇效果。

● 重懸細胞的過程中，請務必要輕柔，以免損傷細胞，但同時也一定要充分重懸，這樣細胞在復蘇時才不會成團。

● 細胞操作請注意無菌。

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