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上海科興商貿有限公司
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閱讀:599發布時間:2014-5-5
1. 細胞一定要貼在玻片上(可以放入24孔板),為后面照像打基礎。細胞密度適中,大約60-75%滿片即可,否則容易脫片。
2. 取出細胞后用4%多聚甲醛固定15分鐘,現用現配。(以下各步驟切毋使玻片干燥)
3. PBS沖洗
4. 0.1%Triton作用20分鐘
5. PBS沖洗
6. 10%正常血清封閉10分鐘
7. 加入一抗,4度孵育過夜(找個小瓶蓋將小玻片支起來,抗體就不容易溢出),還要記住“砸片”,就是抗體從較高處落到片子上,以分布均勻。抗體稀釋度1:60,較常用!
8. PBS沖洗4次,各5分鐘
9加入熒光二抗,室溫30分鐘。抗體稀釋度1:400,較常用!
10. 同8。
11. 90%甘油封片。也很關鍵阿,多封幾次才有體會。
12. 避光保存,或到顯微鏡下觀察。
商鋪:http://www.kindlingtouch.com/st115293/
主營產品:服務ELISA試劑盒、檢測試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學試劑盒、金標檢測試劑盒、細胞凋亡試劑盒、生化試劑盒。各種動物血清,各種抗體,細胞,免疫組化試劑盒
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