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甲型肝炎病毒細胞受體1,HAVCR1/TIM1

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所在地上海市

更新時間:2016-05-24 11:14:27瀏覽次數(shù):269次

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甲型肝炎病毒細胞受體1,HAVCR1/TIM1,
產(chǎn)品類型 一抗
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甲型肝炎病毒細胞受體1,HAVCR1/TIM1,Western的經(jīng)驗:
1.關(guān)于反復標記和再標記:一張膜上可以同時標記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標記了(Re-Blot),有些公司有再標記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-2713R 甲型肝炎病毒細胞受體1 HAVCR1/TIM1
Ys-0843R HA tag標簽抗體 HA tag
Ys-0966R HA tag標簽抗體 HA tag
Ysm-0966M HA tag標簽單克隆抗體 HA tag
Ys-0540R 肝細胞生長因子激活物抑制劑抗體 HAI-1
Ys-1557G 人乙肝表面抗原抗體(包被) HBsAg
Ys-0847R 血紅蛋白α1抗體 HBA1/Alpha globin
Ysm-2118M 人血紅蛋白單克隆抗體 hHb
Ysm-0501M 人乙肝表面抗原抗體 HBsAg
Ysm-2024M 人乙型肝炎表面抗原單克隆抗體(檢測) HBsAg
Ysm-2000M 人乙型肝炎核心抗原單克隆抗體 HBcAg
Ysm-2022M 人乙肝e抗原抗體(1) HBeAg(1)
Ysm-2023M 人乙型肝炎e抗原單克隆抗體(2) HBeAg(2)
Ys-2169R VWCE抗體 VWCE
Ys-2170R VWCE抗體 VWCE
Ys-3576R 肝素結(jié)合性表皮生長因子抗體 HB-EGF/DTSF
Ys-2171R 上調(diào)基因4抗體(N端) URG4

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唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素1抗體,sialoadhesin

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