大鼠可溶性E選擇素（sE-selectin）ELISA 試劑盒
產品英文名稱：Rat soluble E-selectin,sE-selectin ELISA kit
規格：48T/96T
檢測方法：雙抗體夾心酶聯免疫法（ELISA）
標本：血清，血漿，細胞上清液，組織等
種屬：Rat鼠
試劑盒說明書：請來電或者郵件索取
價格：詢價（ : ：劉）

大鼠可溶性E選擇素（sE-selectin）ELISA 試劑盒

ELISA關鍵步驟為以下幾點:
1、盡量用八道或者十二道移液器加樣。對于相同的試劑，經如二抗，酶，顯色液，終止液等。
2、自己的樣品，因為每一孔的樣品不一樣，用排槍加有些麻煩，如果一次的樣品比較少，而自己加樣又比較快，可以一個孔一個孔的加，但如果想一次把96或者48T的做完，可以先擺好一些PCR管或者準備一個96孔細胞培養板。將自己的樣品先加到PCR管或者培養板中（此板間距與酶板板相同）。記得加一定的余量，如一次加樣是50ul，可以先加70ul。加完后再用排槍加樣，這樣可以縮短加樣時間，減小每個孔間的時間誤差。
3、如果有多余的孔，標準品孔可以做復孔，在自己的樣品前加一次標準品，加完樣品后再加一次標準品。如果孔不夠，那么可以將標準品放在樣品中間加。

操作步驟 ：
1. 取出 試劑盒，室溫（ 20 -25 ℃）放置 30 分鐘。
2. 分組： 取出 96 孔板 根據待測樣品數 量加上標準品的數量決定所需板條，把剩余的板條繼續
冷藏處理，分別設標準品組（6個濃度）、空白 孔、待測樣品組。
注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入100ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入100ul的蒸餾水；其余微孔中加入100ul的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul 的酶標溶液 （空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于 37 ℃恒溫孵育恒溫孵育 1小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15 -30s 30s，充分清洗酶標板5次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑A液 50ul 后，再加入顯色劑 B液 50ul 。
8. 終止： 25 -37 ℃下避光反應10 -15分鐘， 加入 50 ul 終止液。
9. 讀板：在 450nm波長讀取各孔的O 值。注： 讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應后的30 分鐘內，以免影響準確性。

數據計算
1. 繪制標準曲線：各標準品 OD 值減去底色即堅強空白孔OD 值（數據處理如下），繪制標準曲線圖。
1.1軟件處理：建議用戶使logit-log模式或四參數據處理模式（ y=（a-d）/（1+（x/c）^b）+d ）
1.2計算器或手工作圖處理：Logit-log 計算：以6個標準品OD 值的 Logit為縱坐標 y，以標準品的濃度的 log值為橫坐標X，繪制曲線圖。logit值計算公式如下:logit=ln（B/ B0）（1－B/ B0）手工
作圖：以標準濃度取log值為橫坐標，對應的logit值為縱坐標，在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標，對應的 B/B0B為縱坐標在 logit-log坐標紙上畫出標準曲線（理想化時是一條直）。
2. 根據待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標紙，查出的數值應取反對數才是zui后濃度值。
3.敏感度：1.0µmol/L