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北京雅安達生物技術有限公司

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德國* *Ultrapure 100 Buffer Set 高品質

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更新時間:2022-08-03 13:42:16瀏覽次數:472次

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德國* *Ultrapure 100 Buffer Set 高品質

   德國* *Ultrapure 100 Buffer Set 高品質

性能
使用Ultrapure 100 Buffer Set可純化多至100 mg的不含內毒素的質粒DNA,該系統結合了QIAGEN陰離子交換技術與內毒素去除技術,可用于制備超純DNA。其的分離性能可確保制備的DNA純度高,不低于通過連續兩輪CsCl梯度離心制備的DNA純度。

Ultrapure 100 Buffer Set提供的用于交換樹脂的緩沖液,經驗證其所含內毒素含量均低于10 EU/ml(BioWhittaker Kinetic-QCLTest驗證)。

原理

純化的質粒DNA中的內毒素污染水平取決于純化方式。硅膠純化的DNA表現出*的內毒素污染水平。使用QIAGEN、QIAfilter和HiSpeed的質粒DNA純化試劑盒,以及通過兩次CsCl超速離心所制備的DNA純度很高,內毒素污染水平相對較低。QIAGEN Ultrapure 100 system含有內置的內毒素去除步驟,純化得到的質粒DNA的內毒素含量低于0.1 EU/µg。

內毒素,也被稱為脂多糖或LPS,是大腸桿菌等革蘭氏陰性菌細胞膜的組成成分之一(參見Bacterial cell wall)。在質粒純化的裂解過程中,內毒素釋放出來,對于內毒素敏感的細胞系,可嚴重降低其轉染效率。另外內毒素會與DNA競爭轉染試劑,影響質粒DNA的攝取量。內毒素還會誘導巨噬細胞和B細胞等免疫細胞發生非特異性免疫活化反應,導致對轉染結果的錯誤解讀,包括誘導合成蛋白質和脂質,如IL-1和前列腺素。總的來說,內毒素在轉染反應中是不可控變量,影響反應結果及結果的重復性,使結果難以比較和分析。在基因治療研究中,內毒素會導致內毒素休克綜合癥和補體級聯反應,影響研究結果。

操作流程
細菌菌體在堿性環境下裂解,并通過離心澄清裂解液(參見Ultrapure 100 procedure)。使用的Endotoxin Removal Buffer除去內毒素,并將裂解液上載到Ultrapure 500 Resin。
應用

Ultrapure 100 Buffer Set配合Ultrapure 500 Resin純化的質粒DNA,其純度相當于兩次CsCl梯度離心所純化的DNA的純度。簡單的內毒素去除步驟可確保純化的DNA所含內毒素不超過0.1 EU/µg DNA。純化的DNA適用于多種敏感的應用,包括:

質粒介導的基因沉默
轉染
基因治療研究

對外承攬試驗:免疫組化,熒光,TunelElisaWB

原位雜交,比色法,HE染色,特染,圖像分析,!

    (北京雅安達生物技術有限公司)

 

 

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