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北京雅安達生物技術有限公司

大鼠糖化白蛋白(GA)ELISA檢測試劑盒說明書

時間:2014-2-28閱讀:386
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 大鼠糖化白蛋白(GA)ELISA檢測試劑盒

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檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠糖化白蛋白(GA)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠糖化白蛋白(GA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 大鼠糖化白蛋白(GA)樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 大鼠糖化白蛋白(GA)操作步驟

  1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.   設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3.   待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加*40μL;
  4.   隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體50μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  6.   所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   所有孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD

 大鼠糖化白蛋白(GA)免責聲明

1.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或大鼠體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

2.   嚴格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。

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