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上海哈靈生物科技有限公司
主營產品： ELISA代測服務,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒,ELISA試劑盒說明書,大鼠ELISA試劑盒 |
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公司信息
哈靈生物提供 Real time PCR 技術服務
2013-7-22 閱讀(779)
一、樣品制備方法:
1.懸浮細胞：
懸浮細胞培養液倒入離心管中，離心沉積細胞，棄去上清液。參入1ml PBS懸浮細胞，轉入小離心管中，低速離心沉淀細胞，棄去PBS，將細胞沉積（1×107個細胞）放入-70℃ 冰箱保管。干冰運送。也能夠在細胞沉積中參加1ml的 Trizol 裂解液重復吸打幾回，目視可見細胞層溶解*后，-70℃保管作用更佳。
2.貼壁細胞：
取大約1×107個貼壁細胞，胰酶消化后參入PBS懸浮細胞，低速離心搜集，棄去液體，參加 1 ml PBS懸浮細胞，轉入1.5ml離心管中，低速離心沉積細胞，棄去PBS，放入-70℃冰箱保管。干冰運送。也能夠在細胞沉積中參加1ml的 Trizol 裂解液重復吸打幾回，目視可見細胞層溶解*后，-70℃保管作用更佳。
3.組織：
收集新鮮組織（注意：生物體逝世后1分鐘內取資料并保管好），組織塊以PBS或生理鹽水清潔干凈，切為小塊，放入液氮或-70℃冰箱中保管，干冰運送。也可每 50-100 mg 組織加1 ml Trizol溶液勻漿裂解組織樣品。勻漿的裂解液4℃ 短期保管（1個月）。-20℃或-70℃長時間保管。
二、樣品的要求：
1. 盡可能新鮮的樣品。
2. 質量大約150毫克的組織樣本。
3. 細胞數大于1×107的細胞樣本
三、注意事項：
1.因RNA比較容易出現降解，建議將標本加入Trizol后運輸。
2.實驗所需要準備的取材工具以及組織存放器皿等必須得經過滅菌除酶處理。
3.取材的實驗環境要求沒有RNA酶污染。
4.客戶必須自備引物。也可以委托本公司設計合成。
