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技術文章

培養(yǎng)基的常識及其配制方法解說

閱讀:316發(fā)布時間:2013-3-5

 簡介

  培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在2~6℃的冰箱內。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,現(xiàn)在均改制成粉末。

  培養(yǎng)基的配制

  1.配料

  配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋》。

  2.溶解

  淀粉溶解:少量冷水調成糊狀

  加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊

  加熱邊攪拌以防止燒焦。

  3.調PH

  用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養(yǎng)基調節(jié)到所要求的值。

  4.過濾

  濾紙或棉花進行過濾。

  5.分裝

  一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

  (1)三角瓶

  若作靜置培養(yǎng),則100 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,zui多不能超過150 ml培養(yǎng)基/250 ml的

  三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20 ml培養(yǎng)基/250

  ml的三角瓶,保證通氣良好。

  (2)試管分裝

  液體培養(yǎng)基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;

  固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。

  6.包扎

  分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

  7.滅菌

  按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)

  基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。

  8.擺斜面

  滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。


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