優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。

　　1.標(biāo)本的采取和保存

　　大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG聚合，使間接法的試劑本底加深。超過(guò)一周測(cè)定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。

　　抗凝不*的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽(yáng)性，建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。

　　2.加樣

　　加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出。

　　3.保溫

　　在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，反應(yīng)板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。

　　4.洗滌

　　洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)。可以說(shuō)在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。

　　洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%～0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。

　　洗板時(shí)注意各種試劑盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀釋?zhuān)瑧?yīng)按要求稀釋?zhuān)玫乃妼?dǎo)率在1.5us/cm之下，洗液如果結(jié)晶應(yīng)待其融解后配制。保證洗板浸泡時(shí)間為40秒左右，孔內(nèi)液體被洗板機(jī)吸收得越干凈洗滌效果更好，手工洗板防止洗液在孔內(nèi)形成氣泡。

　　5.顯色和比色

　　TMB經(jīng)HRP作用后，約40分鐘顯色達(dá)，隨即逐漸減弱，至2小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類(lèi)終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間（12～24小時(shí)）不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類(lèi)酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)（450nm）測(cè)讀吸光值。酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀，通常指于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測(cè)范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001，準(zhǔn)確性為±1%，重復(fù)性達(dá)0.5%，酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，操作時(shí)室溫宜在15～30℃，使用前先預(yù)熱儀器15～30分鐘，測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。

　　測(cè)讀A值時(shí)，要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波長(zhǎng)。有的酶標(biāo)儀可用雙波長(zhǎng)式測(cè)讀，即每孔先后測(cè)讀兩次，*次在zui適波長(zhǎng)（W1），第二次在不敏感波長(zhǎng)（W2），兩次測(cè)定間不移動(dòng)ELISA板的位置，zui終測(cè)得的A值為兩者之差（W1-W2）。雙波長(zhǎng)式測(cè)讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

卡邁舒（上海）生物一直秉承以用戶需求為核心，在專(zhuān)注上海本地市場(chǎng)開(kāi)拓的同時(shí)，為全國(guó)各地區(qū)科研單位提供實(shí)驗(yàn)高質(zhì)量產(chǎn)品，優(yōu)質(zhì)、用心的服務(wù)贏得了眾多同仁的信賴和好評(píng)，逐漸樹(shù)立起公司良好品牌。公司不僅僅提供專(zhuān)業(yè)的科研產(chǎn)品，同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系，為您實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中遇到的問(wèn)題和困難提供指導(dǎo)幫助。我司堅(jiān)信，通過(guò)我們不斷的努力和追求，一定能夠?qū)崿F(xiàn)與各大科研單位互利共贏！

ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體，而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大，

可概括四個(gè)方面：

1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。

2、研究抗酶抗體的合成。

3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。

4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。

Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。指標(biāo)齊全elisa試劑盒供給科研單位實(shí)驗(yàn)研究,高校發(fā)布文獻(xiàn),可提供免費(fèi)代檢測(cè),一周出數(shù)據(jù),公司具有國(guó)內(nèi)外的技術(shù)水平,更好的售后服務(wù)和優(yōu)質(zhì)的解決方案,為您提供高品質(zhì)高服務(wù)高創(chuàng)新的產(chǎn)品。

公司客戶遍布華中華東華西華北華南,各大地區(qū),售前售中售后*貼心服務(wù)，*快遞送貨上門(mén),需了解試劑盒詳情,請(qǐng)點(diǎn)擊本頁(yè)右上方“交談”向本公司客服索取產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。

憑借著高質(zhì)量的產(chǎn)品，良好的信譽(yù)，優(yōu)質(zhì)的服務(wù)，產(chǎn)品全國(guó)近三十多個(gè)省、市、自治區(qū)。竭誠(chéng)與各地區(qū)商家雙贏合作，共同發(fā)展，共創(chuàng)輝煌！...

公司產(chǎn)品瀏覽：http://www.kindlingtouch.com/st100044

相關(guān)產(chǎn)品發(fā)布：http://www.kindlingtouch.com/Product/detail/6008551.html

相關(guān)文章：http://www.kindlingtouch.com/st100044/Article_138316.html

其他指標(biāo)ELISA發(fā)布：雞促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）ELISA試劑盒          Chicken ACTH ELISA Kit
雞促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒          Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
雞C反應(yīng)蛋白（CRP）ELISA試劑盒        Chicken C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit
雞α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）ELISA試劑盒         Chicken α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit
雞流行性乙型腦炎抗體IgG（JE IgG）ELISA試劑盒            Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA Kit
雞血小板因子4（PF-4/CXCL4）ELISA試劑盒           Chicken Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）ELISA試劑盒           Chicken Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA KIT
雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）ELISA試劑盒           Chicken Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA kit
雞B因子（BF）ELISA試劑盒            Chicken factor B,BF ELISA Kit
雞5核苷酸酶（5-NT）ELISA試劑盒          Chicken 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit
雞*腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）ELISA試劑盒         Chicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit
雞白介素3（IL-3）ELISA試劑盒        Chicken Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit
雞L苯*解氨酶（PAL）ELISA試劑盒         Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）ELISA試劑盒       Chicken N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit
雞17-酮類(lèi)固醇（17-KS）ELISA試劑盒          Chicken 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit
雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）ELISA試劑盒          Chicken glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit
雞生長(zhǎng)因子（GH）ELISA試劑盒         Chicken GH ELISA Kit
雞1,3-βD葡葡糖苷酶（1,3-βD glucosidase）ELISA試劑盒        Chicken 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit