英文簡(jiǎn)稱:UMNSAH/DF-1細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:雞胚胎成纖維細(xì)胞;UMNSAH/DF-1
規(guī)格:T25
形態(tài)特性:成纖維母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
特征特性:
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS(gibco)
傳代方法:1:2傳代
貨號(hào):CS-X63213
公司產(chǎn)品僅用于科研公司有大量的優(yōu)質(zhì)細(xì)胞,還提供細(xì)胞的全程后期服務(wù),可以向?qū)I(yè)人士咨詢?cè)敿?xì)的細(xì)胞培養(yǎng)條件,凍存方法,及相關(guān)培養(yǎng)技術(shù)。
運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)范:
主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化:
(1)主動(dòng)脈硬化。
(2)主動(dòng)脈瘤
(3)主動(dòng)脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
(2)鑒定:肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
4-(2-羥乙)吡啶仰孔菌拉丁屬名: Penicillium polonicum
4-(2-羥乙)吡啶波蘭青霉拉丁屬名: Chaetomium funicola
4-溴-3-繩生毛殼拉丁屬名: Kurthia gibsonii
7--6-硝-4-羥喹唑啉吉氏庫(kù)特菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
7--6-硝-4-羥喹唑啉釀酒酵母拉丁屬名: Escherichia coli
2-氨煙大腸埃希氏菌拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
2-氨煙佛雷德里克斯堡假單胞菌用途: 微生物肥料
2-氨煙Bacillus aryabhattai 用途: 食用
10-溴-1-癸平菇拉丁屬名: Escherichia coli
10-溴-1-癸大腸埃希氏菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
D-纖維二糖八乙酯栗疫菌拉丁屬名: Penicillium griseoroseum
D-纖維二糖八乙酯灰玫瑰青霉拉丁屬名: Acremonium murorum
異麥芽糖墻支頂孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
4,5-二鄰苯二蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Cohnella panacarvi
4,5-二鄰苯二科恩氏菌拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus
N-苯鄰苯二球形賴氨芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
UMNSAH/DF-1細(xì)胞神經(jīng)元素2抗體珍珠母(標(biāo)準(zhǔn)品) Antipyrine
抑癌因NDRG3抗體正丁苯酞;丁酞內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Thymol
有絲分裂氧化酶1抗體正二十九烷 Fluorescein disodium salt
NADPH oxidase 3抗體芝麻林素(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Methyl-5-nitroimidazole
NADPH氧化酶NOX家族的成員4抗體芝麻素(標(biāo)準(zhǔn)品) Dihydralazine sulphate
分裂周期相關(guān)蛋白1抗體知母(標(biāo)準(zhǔn)品) Amitriptyline HCl
NFAM1抗體知母皂苷A1 IPRATROPIUM BROMIDE
環(huán)指蛋白67抗體知母皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品) DL-Lysine Acetylsalicylate
神經(jīng)母瘤抑瘤蛋白1抗體知母皂苷BII(標(biāo)準(zhǔn)品) Guaifenesin
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡,co2孵箱。
1.2 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。