DAPI染色液免疫檢測產品說明:
DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一種能夠與DNA強力結合的熒光染料,常用與熒光顯微鏡觀測。因為DAPI 可以透過完整的細胞膜,它可以用于活細胞和固定細胞的染色。分子式為C16H15N5·2HCl ,分子量為350.25 ,CAS Nμmber 28718-90-3。
DAPI可以穿透細胞膜與細胞核中的雙鏈 DNA 結合而發揮標記的作用,可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光,和 EB 相比,對雙鏈 DNA的染色靈敏度要高很多倍。顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞,熒光顯微鏡觀察細胞標記的效率高(幾乎為100 %),且對活細胞無毒副作用。DAPI 染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈 DNA 染色。細胞經熱激處理后用 DAPI染色 3分鐘,在熒光顯微鏡下可以看到到細胞核的形態變化。
DAPI的大激發波長為340nm,大發射波長為488nm,DAPI和雙鏈 DNA結合后,大激發波長為360nm,大發射波長為460nm。
本DAPI染色液可以直接用于固定細胞或組織的細胞核染色。
使用方法:
1.對于固定后的細胞或組織樣品,適當洗滌去除固定劑。如果需要進行免疫熒光染色,可進行免疫熒光染色,染完畢后再進行 DAPI 染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行DAPI染色。
2.對于貼壁細胞或組織切片,加入少量 DAPI 染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。
3.室溫孵育5-10分鐘。
4.吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS或生理鹽水洗滌 2-3次,每次 3-5分鐘,洗掉未結合的DAPI。
5.用帶有 360nm 激發波長,460nm 發射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。
注意事項:
1.熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
產品名稱 | DAPI染色液免疫檢測 | 貨號 | CS-C6039 |
英文名稱 | 規格 | 50ml |
保存條件:-20℃避光保存,一年有效
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
細胞生物學研究的常用技術有哪些:
1.顯微技術:包括顯微觀察,顯微操作.
2細胞組分分析技術:離心分離技術,生物大分子定位技術,定量細胞化學分析技術.
3.細胞工程:細胞培養。
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當分裝保存。反復凍融過程中,可能會導致檢測試劑中出現少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經測試不會影響后續的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法,實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
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